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PCR跑胶的目的是找出目的片段，我们怎么知道哪个是我们要的目的片段呢

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电动牙刷

艾优

艾优 PCR

讨论回答 (7)

PCR扩增过程中，一般会得到多个模板对应的产物，需要通过后续的纯化和测序等步骤来确定是否为所期望的片段。此外，在设计引物时需注意避免引物二重剪接和非特异性扩增等问题，以提高实验准确性。

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还可以检测扩增的特异性。电泳时跟Marker一起跑，根据位置确定片段大小，根据比对其他物种相应片段的大小，推测其是否可能是目的片段，当然，最终的确定是根据测序结果。

----中国西部生命科学论坛

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你好！

线性片段小片段最快在最下面大片段在最上

环状比线性的快。。

希望对你有所帮助，望采纳。

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电泳时一定让样品和Marker一起跑，根据位置确定片段大小，根据比对其他物种相应片段的大小，推测其是否可能是目的片段。常用的DNA Marker有：λ / HindIII DL5000

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片段越长跑的越慢，因此不同长度的链就被分开了。
Marker的作用是，它是已知长度的一些片段，你看你自己的片段迁移率和谁像，就说明接近那个长度。
越长的片段越应该用软一些的胶，越短的用越硬的，软硬是形容浓度，也就是交联度的。因此基因组用0.7%左右的胶，质粒1.3%，短片段1.5~2.0.
这些数字也不是一定的，稍微有变化无所谓，比如长片段用了硬胶那就要多跑，跑很久。而短片段用软胶了可就麻烦了，很可能不形成条带

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设计引物的时候你就应该知道是多大片段了啊，不然你的引物是怎么设计出来的？

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1 预先已知到目的片段的大小，PCR跑胶验证该大小的片段是否跑出来，点Marker就可以区别；

2 预先未知到目的片段的大小，比如5‘RACE PCR，这将出现的片段（一般是最大的条带）克隆，测序，然后看是不是所要的带

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